JasemJasem
K Vitamini LC-MS/MS Analiz Kiti
K vitamini, K vitaminine bağımlı Gla proteinlerinde glutamik asit kalıntılarının (Glu) gama-karboksiglutamik asit kalıntılarına (Gla) enzimatik modifikasyonu için bir kofaktördür. Bu Gla proteinleri hemostaz, kemik metabolizması, vasküler kalsifikasyon ve hücre proliferasyonu için gereklidir. K vitamini doğada yeşil yapraklı sebzelerde, alglerde ve bazı bitkisel yağlarda filokinon (K1 vitamini) olarak bulunur ve menakinonlar (K2 vitamini MK-n olarak da adlandırılır, burada n izoprenoid birimlerinin sayısıdır) et, yumurtada ve fermente gıdalar bulunabilir. K vitamini menadionunun sentetik bir formu (K3 vitamini) olarak bazı hayvan yemlerinde katkı maddesi olarak bulunabilir.
Kit Özellikleri
K vitamininin 5 formunun konsantrasyonlarının eş zamanlı ölçümü
Toplam analiz süresi 12 dk
Tüm formlar için tek numune hazırlama, numune hazırlığında SPE kullanmaksızın protein çöktürmesinin ardından kolay sıvı-sıvı ekstraksiyon adımı
Uzun ömürlü HPLC kolonu
Parametreler
Vitamin K1-Filokinon, Vitamin K1-2,3-Epoksit, Vitamin K2-7-Menakinon, Vitamin K2-2,3-Epoksit ve Vitamin K2-4-Menakinon
Numune Türü
Serum/Plazma
Özellikler
Numune Hazırlama
Aşama 1
400 μL serum numunesi/kalibratör bir cam santrifüj tüpüne (tüp-1) pipetleyin
Aşama 2
800 μL Reaktif 1 ekleyin, 5 s vorteksleyin
Aşama 3
25 μL iç standart solüsyonu ekleyin, ardından 2 ml Reaktif-2 ekleyin ve 3 s vorteksleyin
Aşama 4
4000 rpm’de 5 dk santrifüjleyin
Aşama 5
2.4 ml üst fazı yeni bir cam tüpe (tüp-2) aktarın ve azot akışı altında buharlaştırın. (Üst faz, 30 °C sıcaklıktaki su banyosu kullanılarak ~15 dakika boyunca 7 psi’de buharlaştırılabilir)
Aşama 6
Tüp-2’yi 100 µl Reaktif-3 ile çözün ve bir HPLC vialine aktarın, sisteme enjekte edin
Teknoloji
Sıvı Kromatografi
Sıvı kromatografi sistemleri, hareketli faz, sabit faz ve dedektör gibi temel bileşenlerden oluşur. Bu sistemler kütle spektrometresi (LC-MS/MS) ile birleştirildiğinde, maddelerin daha doğru tanımlanması ve çok düşük miktarlarda bile güvenilir şekilde ölçül...
Daha Fazla