Jasem
Kantitatif Karnitin/Açilkarnitin LC-MS/MS Analiz Kiti
Açilkarnitinler, amino ve yağ asitlerinin parçalanmasından türetilen L-karnitin’in asetillenmiş formlarıdır. Açilkarnitin analizi, mitokondriyal yağ asidi β-oksidasyonu ve organik asit metabolizması bozukluklarının biyokimyasal tespiti için yapılır. Açilkarnitin analizi ile ortaya çıkan koşullar, ortak olarak, farklı hücre içi bölmelerde ifade edilen birkaç karnitin açil-CoA transferazından biri için substratlar olan kısa, orta ve/ veya uzun zincirli açil-CoA türlerinin birikimine sahiptir.
Son zamanlarda, açilkarnitin formlarını ölçmek için bir sıvı kromatografik (LC) ayırma adımını içeren MS/MS yöntemlerine olan yönelim artmaktadır. Jasem Kantitatif Karnitin/Açilkarnitin LC-MS/MS Analiz Kiti karnitin/açilkarnitinlerin kantitatif analizinin yanı sıra total C0’ın kantitatif analizine de çözüm sunmaktadır.
Özellikler
Kit Özellikleri
Serum/plazma matrisinde serbest karnitin/açilkarnitinin 10 dk’da kantitatif analizi
Numune hazırlama için sadece birkaç pipetleme adımı; protein çöktür ve enjekte et
Yalnızca toplam karnitin tayini için basit bir hidroliz adımı
Kararlı izotop etiketli iç standart kullanımı
Düşük hacimli hasta numunesi
Uzun ömürlü HPLC analitik kolonu
Parametreler
Karnitin (serbest)-C0, Asetilkarnitin-C2, Propiyonilcarnitin-C3, Butirilkarnitin-C4,
İzovalerilkarnitin-C5, Hekzanoilkarnitin-C6, Oktanoilkarnitin-C8, Dekanoilkarnitin-C10,
Dodekanoilkarnitin-C12, Tetradekanoilkarnitin-C14, Hekzadecanoilkarnitin-C16,
Oktadekanoilkarnitin-C18 ve Oktadekenoilkarnitin-C18:1
Numune Türü
Serum/Plazma
Numune Hazırlama
Aşama 1
Serbest Karnitin/Açilkarnitin için Numune Hazırlığı
50 µL serum/plazma numunesi bir cam santrifüj tüpüne alınır
Aşama 2
Üzerine 25 µL iç standart solüsyonu eklenir ve 5 s vortekslenir
Aşama 3
Ardından 425 µL reaktif-1 (protein çöktürme) eklenir, 5 s vortekslenir ve 4000 rpb’de 5 dk santrifüj edilir
Aşama 4
Süpernatant temiz bir HPLC vialine alınır ve sisteme enjekte edilir
Numune Hazırlama
Aşama 1
Toplam Karnitin/Açilkarnitin için Numune Hazırlığı
Bir ependorf tüp içerisine 50 µL of serum/plazma numunesi alınır
Aşama 2
50 µL reaktif-2 (hidroliz için) eklenir ve 5 s vortekslenir, ardından 65 oC’de 15 dk inkübe edilir.
Aşama 3
50 µL reaktif-3 eklenir, 5 s vortekslenir ve 4000 rpb’de 5 dk santrifüj edilir
Aşama 4
50 µL hidrolizat bir cam santrifüj tüpüne alınır
Aşama 5
Üzerine 25 µL iç standart solüsyonu eklenir ve 5 s vortekslenir
Aşama 6
Ardından 425 µL reaktif-1 (protein çöktürme) eklenir, 5 s vortekslenir ve 4000 rpb’de 5 dk santrifüj edilir
Aşama 7
Süpernatant temiz bir HPLC vialine alınır ve sisteme enjekte edilir
Teknik Özellikler
| Bileşik | Doğrusallık (R²) | Tekrarlanabilirlik (Günüçi LLQC %RSD) | Tekrarlanabilirlik (Günüçi HLQC %RSD) | Tekrarlanabilirlik (Günlerarası LLQC %RSD) | Tekrarlanabilirlik (Günlerarası HLQC %RSD) | Geri Kazanım (LLQC %) | Geri Kazanım (HLQC %) | LOQ (nmol/ml) |
|---|
| Karnitin (serbest) | 0,9998 | 2,83 | 1,02 | 2,75 | 2,01 | 99,70 | 90,79 | 0,057 |
| Asetilkarnitin (C2) | 0,9998 | 0,99 | 0,94 | 1,04 | 0,98 | 93,33 | 109,84 | 0,057 |
| Propiyonilkarnitin (C3) | 0,9999 | 1,32 | 0,94 | 1,33 | 1,18 | 109,89 | 104,97 | 0,017 |
| İzo-/Butirilkarnitin (C4) | 0,9998 | 0,94 | 0,78 | 0,91 | 1,78 | 116,70 | 98,80 | 0,009 |
| İzovaleri-/2-Metilbutirilkarnitin (C5) | 0,9998 | 0,95 | 0,71 | 0,76 | 0,93 | 111,70 | 97,90 | 0,009 |
| Hekzanoylkarnitin (C6) | 0,9999 | 0,71 | 0,64 | 0,91 | 1,17 | 104,30 | 104,80 | 0,009 |
| Oktanoilkarnitin (C8) | 0,9999 | 0,69 | 0,87 | 0,95 | 0,96 | 98,03 | 106,62 | 0,009 |
| Dekanoilkarnitin (C10) | 0,9999 | 0,75 | 0,61 | 1,05 | 1,03 | 101,88 | 105,80 | 0,009 |
| Dodekanoilkarnitin (C12) | 0,9999 | 0,89 | 0,85 | 0,84 | 0,94 | 103,90 | 104,10 | 0,009 |
| Tetradekanoilkarnitin (C14) | 0,9999 | 0,78 | 0,88 | 0,88 | 0,94 | 104,00 | 102,90 | 0,009 |
| Hekzadekanoilkarnitin (C16) | 0,9999 | 0,81 | 1,11 | 0,96 | 1,12 | 103,30 | 106,20 | 0,009 |
| Oktadekanoilkarnitin (C18) | 0,9999 | 0,77 | 1,10 | 0,84 | 1,13 | 101,60 | 106,00 | 0,009 |
| Oktadekanoilkarnitin (C18:1) | 0,9995 | 0,85 | 1,11 | 1,13 | 1,00 | 104,58 | 104,58 | 0,009 |
Teknoloji
Sıvı Kromatografi
Sıvı kromatografi sistemleri, hareketli faz, sabit faz ve dedektör gibi temel bileşenlerden oluşur. Bu sistemler kütle spektrometresi (LC-MS/MS) ile birleştirildiğinde, maddelerin daha doğru tanımlanması ve çok düşük miktarlarda bile güvenilir şekilde ölçül...
Daha Fazla
